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  • 如何为多肽选择合适的荧光剂
  • 本站编辑: 杭州肽佳生物科技有限公司发布日期:2019-11-27 10:27 浏览次数:

荧光物质是具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复至基态时,发出荧光。由于荧光标记较放射标记具有无放射物污染等优点,已经让荧光标记成为研究中的热点。

     分子成像技术因其较高的专一性在当代医学诊断学上具有重要作用。它们能够在分子水平上研究活体对象,将一些疾病发展和治疗康复过程中的重要分子信息可视化。荧光标记是一类重要的分子成像技术,它具有自身独特的优点:高灵敏性、使用材料的非放射性、检测过程的安全性,而且成本不高。

     活性多肽分子可以被荧光基团标记,应用于荧光成像领域。荧光基团分子具有以下功能:其吸收特定波长能量的光子后,立即在另一较长波长区域释放出具有一定能量的光子。对于荧光基团染色能力和效率,有一系列参考准则(主要考察其吸收光子和释放光子,以及重复上述过程)。在这些标准中,摩尔消光系数ε和量子效率QY是最重要的两个衡量荧光强度的参数,它们与光子吸收和荧光发射密切相关。通常来说,摩尔消光系数ε在5000~250000 cm-1 M-1范围之间,量子效率QY在0.05-1.0之间的荧光素将满足分子作为荧光基团的基本要求。



 

    如何选择合适的荧光标记基团取决于您的实验需求。药理学实验研究基本分为体内研究和体外研究两大类。对于体内研究,一般选择发射波长在650-900nm的荧光基团,例如:ICG、Cy5.5和Nile Blue。这是因为这类基团所发出的荧光具有较好的组织穿透能力,受背景干扰较小(水、血红蛋白和脱氧血红蛋白一般都会产生背景干扰吸收,其区域在560nm左右)。对于体外研究,发射波长在400到600nm的荧光基团最为常用,例如:AMC、FITC和TAMRA。

     荧光标记的多肽在现代医学中的应用是很广泛的。例如:用Cy5.5标记的目标多肽研究对c-Met受体的绑定作用。有人设计含有KSLSRHDHIHHH序列的cMBP,其C端 为GGGSC, C端Cys用Cy5.5-Maleimide标记其巯基侧链。研究结果表明:上述Cy5.5-cMBP多肽与U87MG肿瘤细胞共孵24小时后,具有较高的癌细胞摄取值,其响应浓度在纳摩尔级别。