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  • 多肽的筛选及优化一
  • 本站编辑: 杭州肽佳生物科技有限公司发布日期:2019-11-27 10:36 浏览次数:

 小分子活性肽作为疫苗、诊断试剂、药物以及药物先导化合物已成为药物研究领域的新趋势。小分子活性肽有多种筛选方法:基于噬菌体展示肽库、随机合成多肽库、反义多肽库、蛋白质降解(酶法、化学法)、MHC-多肽复合物、蛋白质结构和蛋白质结构预测等。

     噬菌体展示肽库筛选是比较成熟的筛选方法。通过3轮筛选,可获得较理想的菌株,通过DNA测序推测其表达的小分子肽序列,再通过定向合成来验证小分子肽的生物活性。其缺点是库容多样性易受到多种因素的影响,且获得的是小分子肽亲和力较低。

     随机合成肽库可根据客户的需求进行合成,通常生产周期短,库容大,合成一个含10个氨基酸的肽库,其库容可达到1012。通常随机合成肽库有2中合成方法:分开再混合(split and mix)和氨基酸预混合(pre-mix)。分开再混合的方法获得的肽库,其不同序列的含量较一致且每个树脂球只含有一种多肽。氨基酸预混合法获得的肽库,其不同序列的含量千差万别,可能会造成筛选失败。由于库容过于庞大,对筛选到的活性多肽进行结构鉴定是非常具有挑战性的一项工作。

     反义肽库筛选,反义肽库是根据生物学原理设计的肽库,其筛选成功率高,但需要确定目标蛋白关键区域的氨基酸序列。通常可以运用Clustal X等生物信息分析软件进行比对分析确定关键区域的氨基酸序列。氨基酸序列确定后,根据Meker-Idlis(M-I)理论,设计反义肽库。此时,可以直接合成反义肽库进行多肽筛选,也可以通过软件(Discovery Studio)进行模拟筛选获得容量更小的肽库。此类筛选方法由于目标明确且肽库库容较小(一个含10个氨基酸的反义肽库,其库容仅103。),较容易筛选到目标多肽并进行结构确认。

     筛选到目标多肽后,可以通过构建不同的多肽文库,进行功能区域的确认和筛选到活性更强的多肽。

     如果您在多肽筛选方面有需求或疑问,可联系我们的技术,更多内容可参考:网址链接